Monitoring des cultures sur microporteurs
en utilisant les instruments NucleoCounter®
Micro-porteurs – un système de culture évolutif pour les cellules adhérentes
Figure 1: Bioréacteur pour micro-porteur / micro-supports. Les micro-supports offrent une méthode pratique pour la croissance des cellules adhérentes dans les bioréacteurs.
La mise à l’échelle de la production de cellules et de virus peut être difficile. Les flacons de culture de cellules ne sont pas fiables pour la production à l’échelle industrielle lorsqu’une augmentation du volume de production par un facteur de mille est à réaliser. Les micro-supports offrent une méthode pratique et avantageuse pour cultiver des cellules adhérentes dans des bioréacteurs. Les micro-supports servent d’échafaudage sur lequel les cellules adhérentes peuvent s’accrocher, ce qui leur permet de proliférer tandis qu’un bioréacteur maintient les complexes de micro-porteurs avec ses cellules adhérentes librement suspendus dans les milieux. Ainsi, les lignées cellulaires adhérentes sont cultivées comme des cellules en suspension, ce qui simplifie la mise à l’échelle et permet de tirer parti des ressources existantes pour l’optimisation et la production des processus.
Note technique (.PDF):Méthode NucleoCounter® pour mesurer le nombre de cellules et la viabilité dans les cultures de micro-porteurs
Figure 2: Instruments NucleoCounter®. Méthode NucleoCounter® pour mesurer le nombre de cellules et la viabilité dans les cultures de micro-porteurs.
La méthode NucleoCounting détecte les cellules par coloration fluorescente des noyaux cellulaires. Les cellules sont marquées avec le colorant fluorescent DAPI, qui est très spécifique à l’ADN, permettant une détection précise des noyaux cellulaires même en présence de débris cellulaires. L’échantillonnage cellulaire, la coloration fluorescente et le chargement de la chambre de comptage sont combinés en un seul coup de main par la Via1-Cassette™, qui est insérée dans un NucleoCounter® NC-200™ ou NC-3000™ qui calcule le nombre total de cellules et la viabilité.
Gagnez du temps en comptant les cellules qui se développent sur les micro-supports
Une comparaison de la méthode traditionnelle de digestion par trypsine et des étapes de travail avec le NucleoCounter® montre que NucleoCounter® supprime plusieurs étapes de centrifugation, de pipettage et d’incubation. Le processus complet du comptage cellulaire est terminé en moins de 5 minutes.
Digestion traditionnelle de la trypsine et comptage manuel
La méthode NucleoCounter®
Bibliographie:
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